1918年，俄國十月革命期間，沙皇Nicholas二世和他的家人被剝奪政權(quán)并被處以極刑。行刑隊擊斃了他們后，在尸體上潑灑硫酸，以致尸體無法辨認(rèn)，并把他們掩埋在一條公路下的淺坑內(nèi)。他們的殘骸一直去向不明，直到1991年7月，在俄國Ekaterinburg附近的一座淺墓穴內(nèi)發(fā)現(xiàn)了9具骸骨。人們嘗試采用計算機(jī)輔助顱像重合技術(shù)和齒科學(xué)分析等眾多法醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)，但由于面顱破壞嚴(yán)重，常規(guī)面部識別技術(shù)非常困難，得不到任何結(jié)論。

    俄國聯(lián)邦首席法醫(yī)師求助于英國法庭科學(xué)服務(wù)部(FSS)對骸骨進(jìn)行DNA分析以識別骸骨身份，用5個STR (vWA、TH01、F13AI、FESlFPS和ACT-BP2)遺傳標(biāo)記對9具骸骨進(jìn)行了分析。從每具骨架中鉆取大約lg骨粉提取到約50pg DNA，恰可供幾個STR遺傳標(biāo)記的PCR擴(kuò)增。STR基因型發(fā)現(xiàn)9具骸骨中包括Romanov家庭成員（沙皇、皇后及3個孩子）、3個傭人和家庭醫(yī)生。STR等位基因分析可以建立殘骸間的家庭關(guān)系，但仍然必須用Romanov家族的已知后代來證實這些殘骸的確是俄國的皇室家族成員，mtDNA分析技術(shù)解決了這個問題。

    從每具骨架中提取線粒體DNA迸行測序，然后對Romanov家族的母系后代的血液樣本進(jìn)行了測序。愛丁堡公爵，即英國女王Elizabeth的丈夫PHilip親王，是皇后Alexandra母系直系后裔的曾外甥，因此與他的血液樣本費事結(jié)果的比較可以證實孩子間的同胞關(guān)系及與皇后家族的母系關(guān)系。在這次檢測的mtDNA控制區(qū)共740個堿基中，Philip親王與假定的皇后和3個孩子的序列完全匹配，假定沙皇的mtDNA序列與沙皇Nicholas二世外祖母德國地區(qū)卡塞爾的Louise的母系直系后裔的兩個親屬比較后發(fā)現(xiàn)，這兩個親屬與假定的沙皇的mtDNA序列只有nt16169堿基不同。在這個位置，假定沙皇的樣本是兩個堿基的混合(T和C)，即異質(zhì)性，而親屬的血液樣本只有T堿基。

    為了進(jìn)一步核實殘骸的沙皇身份，他們又挖掘了Nicholas二世兄弟Georgij Romanov公爵的骸骨，并由軍方DNA鑒定實驗室檢驗(Ivanov et a1．，1996)，結(jié)果在mtDNA序列的同一堿基位置也發(fā)現(xiàn)有異質(zhì)性。由于在兩個無關(guān)個體間發(fā)生這種異質(zhì)性的機(jī)會非常少，從而證實這些骸骨確是沙皇Nicholas二世和他的家庭成員，并以與皇室家族相襯的葬禮把他們安葬在紅場。盡管另一個實驗室核實了多個個體間的匹配，但是隨著時間的推移，有關(guān)Romanov家族的爭論仍在繼續(xù)。