STR分型檢測一般實驗對樣本的要求10萬個細(xì)胞以上即可,盡管對于口腔拭子樣本一根棉簽上就可以附著10萬個口腔黏膜細(xì)胞,但作為DNA親子鑒定樣本, 在方便采集的情況下,盡可能采集5-6根棉簽。根據(jù)我國2010年4月10日國家發(fā)布的親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范SF/Z JD0105001-2010中的規(guī)定口腔拭子提取DNA……
采用Chelex-100法(見如下步驟)或其它經(jīng)過了驗證的方法抽提DNA。若不經(jīng)過DNA抽提而直接將檢材用于PCR,方法必須經(jīng)過驗證。
從口腔刮拭物樣本中提取DNA:
1) 用牙簽刮拭口腔粘膜,將其放入1.5 mL離心管內(nèi),加入200 μL 5% Chelex(100-200目);攪動,使細(xì)胞脫落;
2) 56℃保溫15-30 min;
3) 高速振蕩5-10 s,沸水煮8 min;
4) 高速振蕩5-10 s,10,000-15,000 r/min離心2-3 min;
5) 取上清液用于擴(kuò)增反應(yīng);2-8℃保存或凍存剩余DNA。