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DNA鑒定之血液、精液和唾液的預(yù)試驗(yàn)

    犯罪現(xiàn)場(chǎng)的法庭證據(jù)形式多樣。例如,在性犯罪案的現(xiàn)場(chǎng)可提取到一塊床單。在法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中,這條床單經(jīng)過(guò)仔細(xì)的檢查后選定某些區(qū)域再進(jìn)一步檢驗(yàn)。在從樣本中提取DNA前,應(yīng)先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)’以確定在某份物證(例如一條褲子)上是否有血液、精液之類的生物體液。在一件臟內(nèi)衣上檢測(cè)血痕或精斑僅能試著分析。法醫(yī)關(guān)注的三種基本斑跡來(lái)自血液精液和唾液。陰道分泌物、尿液和糞便鑒定對(duì)調(diào)查也很重要。    j

    血清學(xué)是一種被廣泛應(yīng)用的利用抗原和血清抗體反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。例如,混合抗A、抗B血清和一份待檢血樣,根據(jù)凝集反應(yīng)進(jìn)行AB0血型分型。在現(xiàn)代法醫(yī)生物學(xué)領(lǐng)域,血清學(xué)仍起著重要作用,但是在一些方面則次于DNA,因?yàn)轭A(yù)試驗(yàn)并不能像DNA分型一樣具備個(gè)體識(shí)別能力。

    1.血痕的檢測(cè)

    血液是由血漿和紅細(xì)胞( erythrocyes)、白細(xì)胞(leukocyres)、血小板(thrombocvtes)等固體成分組成。多數(shù)血液的預(yù)試驗(yàn)著重于檢測(cè)血紅蛋白分子。血紅蛋白存在于紅細(xì)胞中,轉(zhuǎn)運(yùn)氧氣和二氧化碳。Abacus Diagnostics公司(West HillsCA)ABAcardHema TraceR 試劑盒可用簡(jiǎn)單的免疫層析法對(duì)人血進(jìn)行識(shí)別。這項(xiàng)試驗(yàn)的檢測(cè)限為0.07μgml的血紅蛋白,對(duì)人類、高級(jí)靈長(zhǎng)類動(dòng)物及白鼬的血液具有特異性(Johnston et a1.,2003)。

    魯米諾( Luminol)是用于血液識(shí)別的另一種預(yù)試驗(yàn),因電視系列劇《CSI:鑒證實(shí)錄》  ( Crime Scene Investigation)而廣為人知。o.】g3一氨基.鄰苯二甲酰肼和5Og的碳酸鈉混合后加入lOOml的去離子水即制成魯米諾試劑。使用前加入0. 7g的過(guò)硼酸鈉(Saferstein 2001)。向要檢測(cè)的物體上噴灑魯米諾,可快速檢測(cè)大面積的血痕。噴灑過(guò)的樣本必須在  黑暗的環(huán)境中才能看到清晰的熒光。魯米諾還可定位稀釋IOOO萬(wàn)倍的微量血(Saferstein,  2001)o犯罪現(xiàn)場(chǎng)的證據(jù)檢材用魯米諾檢測(cè)后,對(duì)DNA檢測(cè)沒(méi)有抑制作用(Gross et al., 1999)。預(yù)試驗(yàn)并不干擾后續(xù)DNA檢測(cè)的實(shí)證,對(duì)法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室決定怎樣處理生物證據(jù)檢材非常重要( Hochmeister et a1.,1991Budowle eta1.,2000)。

    2.精斑的檢測(cè)

    2/3以上需進(jìn)行法醫(yī)DNA檢測(cè)的案件涉及性犯罪證據(jù)。幾毫升精液中通常含有數(shù)以千萬(wàn)計(jì)的精子。精斑的特異性檢測(cè)有:鏡下檢出精子、酸性磷酸酶( AP)或前列腺特異性抗原(PSAp30)檢測(cè)。一些實(shí)驗(yàn)室用顯微鏡觀察精子的存在,作為性犯罪證據(jù)。然而,無(wú)精子或少精的男性在其射精時(shí)沒(méi)有或僅有少數(shù)精子。另外,做過(guò)輸精管結(jié)扎手術(shù)的男性不釋出精子。因此,精液特異性酶試驗(yàn)在性犯罪案件中確認(rèn)精液的存在時(shí)是很有用的。

    酸性磷酸酶是前列腺分泌到精液中的一種酶,精液中的含量通常比身體其他體液高出400(Sensabaugh ,1979;Saferstein ,2001)。加幾滴0【,萘酚磷酸鈉和固藍(lán)B后呈現(xiàn)紫色,或加人4一甲基傘基磷酸鹽后在紫外燈下出現(xiàn)熒光,均可表示存在AP。面積較大的針織物可將衣物或床單壓在同等大小的濕濾紙上轉(zhuǎn)移,再用濾紙進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)。對(duì)大部分針織物選擇性

的篩查,為后續(xù)的檢驗(yàn)確定精斑的位置(Saferstein2001)。

    前列腺特異性抗原發(fā)現(xiàn)于20世紀(jì)70年代,其中包含名為p30的蛋白質(zhì)(因其分子量為30 000Da),具有法庭科學(xué)價(jià)值(Sensabaugh,1978)。p30最初被認(rèn)為只存在于精液,后來(lái)有報(bào)道稱也少量存在于乳汁(YuDiamandis,1995)和其他體液中。PSA在精液中的濃度為3004200ng/ml(Shaler,2002)Seratec (Goettingen,Germany)Abacus診斷(West Hills,CA)標(biāo)記PSA/p30試劑盒(類似早孕試驗(yàn)試劑)可用于法醫(yī)學(xué)精斑確證實(shí)驗(yàn)( Hochmeisteet al.,1999; Simich et al.,1999)。

    3.精子的直接觀察

    許多法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室傾向于將觀察到精子作為精子的確證試驗(yàn)。最常用的方法是用去離子求潤(rùn)濕的棉簽提取針織物或人類皮膚上已于的精液。將獲得的細(xì)胞涂在顯微鏡載玻片上,加熱固定。固定的細(xì)胞用一種“圣誕樹(shù)”染料染色,這種染料中包括硫酸鋁、核堅(jiān)牢紅、善味酸和靛紅(Shaler,2002)o將染色后的載玻片置于顯微鏡下可觀察到精子特異的頭部囊長(zhǎng)尾巴。圣誕樹(shù)染料可將精子頭部的前端染成紅色或粉紅色,后端染成深紅色,精子的中言墨呈藍(lán)色,尾巴被染成黃綠色( Shaler,2002)。弗吉尼亞大學(xué)的John Herr芷研究一些用熒光標(biāo)記精子頭部而特異性抗體標(biāo)記尾部的“精子素描”方法,以便在女性上皮細(xì)胞過(guò)多情況下觀察到精子細(xì)胞。

    4.唾液斑的檢測(cè)

    針對(duì)淀粉酶的預(yù)試驗(yàn)可用于檢測(cè)唾液的存在。唾液斑基本上是肉眼看不到的,非常難  觀察。評(píng)估法醫(yī)學(xué)樣本的酶含量有兩種常見(jiàn)方法:Phadebas試驗(yàn)和淀粉碘化物輻射狀擴(kuò)散試驗(yàn)( Shaler,2002)。通??稍谝Ш?、煙蒂和水瓶上檢到唾液斑(Abaz et a1.,2002;Shale 2002)。目前正在研究一種利用mRNA圖譜對(duì)包括唾液在內(nèi)的各種體液進(jìn)行檢測(cè)的分子生物學(xué)方法(JuusolaBallantvne2003)。這種分子生物學(xué)試驗(yàn)具有極高的特異性和靈敏性,可同時(shí)檢測(cè)血液、精液和唾液。

聲明:該文觀點(diǎn)僅代表作者本人.
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