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科鑒基因親子鑒定中心之DNA技術(shù)推斷年齡

    年齡鑒定是法醫(yī)學(xué)個體識別的重要內(nèi)容。通過生物檢材準確估計個體年齡可以為案件刮偵破提供重要線索。用DNA技術(shù)進行年齡鑒定豐富了個體識別在年齡推斷方面的內(nèi)容,真有重要的法醫(yī)學(xué)實用價值。

    近年的研究表明,人類年齡超過20歲的個體,其組織細胞中線粒體DNA存在一段4977bp缺失的現(xiàn)象,與年齡增長存在一定的相關(guān)性。有研究者以不同年齡(3個月~ 97歲)的93具解剖尸體的肌肉組織為檢材。提取DNA(核DNA和線粒體DNA)進行PCR擴增。使用的擴增引物為I35/H35,在線粒體基因組中的定位分別為8285/13928。只有當(dāng)特定的4977bpDNA發(fā)生缺失時,這對引物才能擴增出一段667bp的產(chǎn)物DNA。實驗發(fā)現(xiàn)獲得擴增產(chǎn)物所需的模板DNA量隨被測者年齡的增大而減少。尤其明顯的是,20歲以下個體用多達1000ng的模板DNA也無法獲得擴增產(chǎn)物;而70歲以上的個體只需Ing模板DNA即可得到擴增產(chǎn)物。綜合實驗數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)此4977bp線粒體DNA缺失水平與年齡的增長呈正相關(guān)。此研究為進一步通過線粒體DNA缺失確定個體的年齡提供了一個好開端。

    端粒( telomere)是指真核細胞柒色體末端的DNA序列,其生物學(xué)功能是保持染色體的穩(wěn)定。端粒是富含G寡核苷酸的序列,由1216個核苷酸串聯(lián)重復(fù)而成,人類的端粒DNA515kb,主要由TTAGGG片段串聯(lián)重復(fù)構(gòu)成,其重復(fù)次數(shù)為8003000次。Harley等人通過培養(yǎng)不同年齡和人體不同部位的成纖維細胞,觀察端粒DNA長度的變化。發(fā)現(xiàn)隨著培養(yǎng)細胞分裂次數(shù)的增多,端粒DNA長度逐漸縮短,端粒DNA的量也逐漸減少。這種變化與細胞的靜止和生長狀態(tài)無關(guān),只與細胞的分裂次數(shù)相關(guān)。細胞平均倍增一次,端粒DNA的長度大約減少50bpVaziri檢測人類外周血細胞的端粒DNA長度時,也發(fā)現(xiàn)了這種規(guī)律,端粒DNA長度每年丟失41±7.7bp。端粒DNA丟失的速率在人的整個生長過程中是不相同的。青年時期端粒DNA的丟失較緩慢,隨著年齡的增大,特別是進入老年后,端粒DNA長度由于不完全復(fù)制而逐漸縮短。不同種族、不同性別、不同組織端粒DNA有差異,端粒DNA長度不完全相同。這些發(fā)現(xiàn)提示,通過選擇合適人群和組織,檢測端粒DNA長度和端粒DNA量的變化,可以發(fā)現(xiàn)端粒DNA變化與年齡的關(guān)系。這種關(guān)系有可能用于法醫(yī)生物學(xué)檢材推斷年齡的研究。

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