人體病理組織最常用的固定劑是福爾馬林，其他固定劑如乙醇等也有應(yīng)用。不同固定劑對DNA分析結(jié)果的影響差異很大。福爾馬林類固定劑對結(jié)果影響很大，而乙醇或含乙醇類固定劑對結(jié)果的影響較小。
     固定時間越長，DNA抽提率越低，對擴增結(jié)果影響越大，常規(guī)制片中透明用的二甲苯也可破壞DNA。10%中性甲醛液和丙酮對DNA的擴增結(jié)果影響相對較小。
     組織切片中DNA的提取方法1：
      (1)將組織切片剝離在1.5ml的離心管內(nèi)，在管中加約Iml辛烷，混勻，蓋緊后室溫放置30min。
      (2) 12000r/min離心Smin，棄去上清，沉淀為組織和殘存的石蠟。小心吸去壁上殘存的辛烷。重復(fù)上述步驟一  次，以徹底去除石蠟。
      (3)加0.5nd無水乙醇，混勻。12000r/min離心Smin，棄去上清，小心吸去乙醇。重復(fù)前一步，盡可能除去壁上殘存的乙醇（乙醇漂洗可以除去辛烷）。真空干燥或風(fēng)干，使乙醇完全揮發(fā)。
      (4)向上述干燥樣品中加入100一200rul消化液（50mmol/L Tris - HCl pH9.0，10mmol/L EDTA，5% Tween - 20，10mg/ml蛋白酶K）。55℃溫浴3h或37℃溫浴道夜。
      (5)短暫離心，使蓋上和壁上蒸發(fā)冷凝的水分沉至管底。95℃溫浴l0min，滅活蛋白酶K。離心后分裝上清(每份1～10μl)，- 20℃保存。
      1．保存太久或較脆的組織在加入辛烷脫蠟后就會破碎，操作應(yīng)小心以防組織丟失。
      2．干燥樣品時，用封口膜封住離心管，并在其上打幾個小孔，以防止樣品間的交叉污染和來自真空干燥蓋上的雜質(zhì)污染。
      3．干燥樣品時，也可向每管中加3滴丙酮，不加蓋，小心置于37—500C溫浴中以促進丙酮揮發(fā)，同時也可除去殘存的乙醇。
      4．上述操作的混勻步驟不要用旋渦振蕩器混勻，以免機械剪切力造成DNA片段斷裂。