在做完親子鑒定后,所出具的檢測報(bào)告里面,都會(huì)有所檢測的樣本留有者的DNA數(shù)據(jù)的,這些DNA數(shù)據(jù)一般為21位點(diǎn)的,也有40個(gè)位點(diǎn)的。這些所檢測的位點(diǎn)標(biāo)記,一般都是固定的位點(diǎn),是人類社會(huì)科學(xué)發(fā)展過程,通過大量的實(shí)踐和數(shù)據(jù)分析得到的可以有效判定親子關(guān)系的基因位點(diǎn),專業(yè)名稱為STR位點(diǎn),這些位點(diǎn)是具有特異性的,即位點(diǎn)的遺傳密碼子的不同,才使得個(gè)體間存在差異。隨著人類對這些位點(diǎn)的發(fā)現(xiàn),和認(rèn)知,都把這些鑒定固定下來,不給出了專業(yè)的名稱標(biāo)準(zhǔn),使得大家可以根據(jù)這些STR位點(diǎn)的名稱,就可以知道這些位點(diǎn)的信息。那么這些基因位點(diǎn)是怎么篩選和命名規(guī)則的呢?
STR位點(diǎn)的篩選步驟:
1、提取全長的基因組DNA,然后用限制性的酶切割全長DNA片段,通過連接酶把限制性的片段連到載體上構(gòu)成基因組文庫。
2、通過特異的串聯(lián)重復(fù)序列的探針雜交篩選基因組文庫。
3、對于陽性克隆進(jìn)行測序。
4、通過鍘序結(jié)果設(shè)計(jì)引物及進(jìn)行位點(diǎn)特異的PCR分析。
5、位點(diǎn)多態(tài)性分析。
STR位點(diǎn)的篩選原則應(yīng)該遵循以下幾點(diǎn):
1、篩選的STR位點(diǎn)應(yīng)該是廣泛分布于人群中的。
2、重復(fù)片段長度為2-6個(gè)堿基之間。
3、 STR位點(diǎn)應(yīng)具有高度的雜臺性,盡量選擇種屬特異性高的基因座。
各個(gè)STR位點(diǎn)在染色體上的定位相對較遠(yuǎn),STR的重復(fù)次數(shù)應(yīng)該是4個(gè)核苷酸單位,小于4十桉苷酸單位的重復(fù)次數(shù)的STR位點(diǎn)容易產(chǎn)生影子帶確保無連鎖,低突變率。
STR位點(diǎn)的命名;比如D22S119位點(diǎn)D代表DNA,22指的是第22號染色體,S指單一序列,119指該位點(diǎn)在染色體上的位置。STR位點(diǎn)CSFIPO,F(xiàn)CA,及TH01,vWA等按照國際法醫(yī)遺傳學(xué)會(huì)DNA委員會(huì)(ISFH DNA commIssion)的方法對各位點(diǎn)等位基因進(jìn)行命名,即以核心序列重復(fù)的歡數(shù)來命名各位點(diǎn)的等位基因。
CSFIPO, FGA, TH01, TPOX, VWA,D3S1358, D5S818, D7S820, D8Sl179, D13S317, D16S539,D18SS51,D21S11,D21S11和性染色體(Amelogenin)是FBI用來進(jìn)行法醫(yī)鑒定常用的位點(diǎn)。13個(gè)多態(tài)性的STR位點(diǎn)和一個(gè)性染色體基因能夠分三次PCR擴(kuò)增產(chǎn)生14位點(diǎn)的DNA分型圖譜。這13個(gè)位點(diǎn)被命名為CODIS Loci。為了PCR擴(kuò)增片段的分離及檢測更加的靈敏,加入了5個(gè)重復(fù)單位的STR位點(diǎn)PentaD,PentaE,多態(tài)性程度高,而且5個(gè)重復(fù)單位的片段有較少的影子帶(Bacher et al.,1998)。另外北京公司研制的試劑盒增加了D19S433,D16S1043,D2S441、D12S391,D2SL338位點(diǎn),隨著位點(diǎn)數(shù)目的增加檢測的精確度也隨之增加。